Rac噬菌体蛋白RecE及其伴侣RecT介导了高效的线性-线性同源重组

描述

全长Rac噬菌体蛋白RecE及其伴侣RecT介导了高效的线性-线性同源重组，其机制与由λ噬菌体的Redα和Redβ介导的常规重组不同。大肠杆菌菌株GB05-dir可通过DNA片段进行直接克隆（DC）和4-Way重组（4WR），而无需在细胞中维持表达质粒，因为必需的基因位于染色体上。

特征

• 将线性DNA片段直接克隆（DC）到线性质粒主链中

• 4-Way Recombineering（4WR）是一种流线型方法，可在单个体内重组步骤中组装多达四个线性DNA片段的新型质粒（请阅读 新的4WR应用说明）

• 在ybc C位点带有阿拉伯糖诱导性ETγA操纵子（全长rec E，rec T，红色γ和rec A）的大肠杆菌菌株

应用领域

• PCR产物的克隆

• 从消化的基因组DNA克隆线性DNA片段

• 从多达四个线性DNA片段组装质粒，例如用于重组和Cas9辅助标记（RAC标记）的靶向载体

内容

• 直接克隆大肠杆菌菌株GB05-dir的甘油库存

• 线性对照质粒骨架（ColE1复制起点和氨苄青霉素抗性标记基因）

• 线性对照插入物（PCR产品）

• 协议