Red/ET & CRISPR/Cas

在CRISPR / Cas9的功能上增加重组优势，以扩展您的基因组研究

CRISPR / Cas9允许快速敲除或定点诱变，但不适用于更大，更复杂的基因组工程实践。这些可以通过Red / ET重组（重组）来完成，以产生靶向构建体或BAC转基因，从而补充CRISPR / Cas9应用。

例如，与其在顺序步骤中使用CRISPR / Cas9在基因中引入多个突变（而不是每个突变都可能需要先引入两个内源等位基因然后进行原位表征），不如将工作引入更灵活的结果突变成BAC转基因，然后通过CRISPR / Cas9敲除将其引入。

在许多情况下，使用重组可以更轻松地在大肠杆菌中进行精确的工作：

-存在针对人类，小鼠和大多数模型生物的特征明确的BAC库；可从不同供应商处获得的带注释的BAC克隆；

-BAC通常携带目标基因的完整基因组位点，包括所有必要的调控元件；

-Red / ET重组提供了快速可靠的方法来修饰BAC，并准备一个“等位基因”，其中包含感兴趣基因的所有有趣修饰，例如人源化，多个突变，多个SNP的插入等。→“设计师BAC”。

此外，BAC转基因最好通过转座来实现：

-转座酶介导的BAC转基因可确保BAC的全长，单拷贝插入，并可以通过例如Splinkerette PCR轻松鉴定确切的基因组插入位点；

-BAC的多种用途：经过修饰的BAC克隆可以重新用于插入其他细胞系，从而节省了进一步的分析所需的时间和金钱。